新生牛血清浓度的选择

胎牛血清和新生牛血清是细胞常用的天然培养基。胎牛血清通常用于难以培养和脆弱的细胞和干细胞,而新生牛血清通常适用于相对容易培养的细胞,特别是用于病毒疫苗的工业生产和广泛的科学研究领域。在实际应用中,经常需要测定牛血清的浓度。常用浓度为5%~20%,较低浓度的牛血清也是有用的,这主要取决于所用人工合成培养基的类型、组成和营养程度。如果合成培养基营养丰富,牛血清的浓度可以适当降低。这也取决于培养的细胞类型和培养的目的。以水牛卵母细胞为例

2008年,广西大学等单位报道了不同浓度的牛血清和白蛋白对水牛卵母细胞体外成熟的影响卵母细胞体外成熟是体外胚胎生产技术中的一个关键环节。

研究人员将卵母细胞洗涤2-3次,然后将其放入预平衡牛血清(ECS,FCS,注:ECS为发情牛血清)和牛血清白蛋白(BSA)的成熟培养液中,其中对照组使用基础培养液;放入39℃、5%一氧化碳、饱和湿度的培养箱中培养基本培养基是添加了一定量激素(黄体生成素、卵泡刺激素、雌二醇)的培养基培养方法为微滴培养法,在60毫米培养皿中制成12-16滴,每滴加入30-40个卵丘-卵母细胞复合体,培养液滴上覆盖石蜡油

研究人员观察了基础培养液中添加不同牛血清及其浓度对水牛卵母细胞体外成熟的影响:分别为0(对照组)、10%胚胎干细胞、20%胚胎干细胞、10%胚胎干细胞、20%胚胎干细胞结果表明,10%细胞培养液、20%细胞培养液和10%细胞培养液组的细胞成熟度显著高于对照组,其中10%细胞培养液组最为显著。随着FCS血清浓度的增加,成熟度逐渐增加,但无显著性差异。作者认为加入血清是必要的,但不需要太高的浓度。

表明,通过设置观察指标和进行浓度梯度试验可以找到最佳浓度。

浓度

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